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液相色譜柱的使用方法

2016年02月20日14:34 

色譜柱在使用前,最好進行柱的性能測試,并將結果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是最佳條件),只有這樣,測得的結果才有可比性。

1、樣品的前處理:

a、最好使用流動相溶解樣品。

b、使用予處理柱除去樣品中的強極性或與柱填料產生不可逆吸附的雜質。

c、使用0.45µm的過濾膜過濾除去微粒雜質。

2、流動相的配制:

液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的,因此要求流動相具備以下的特點:

a、流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。

b、流動相具有一定惰性,與樣品不產生化學反應(特殊情況除外)。

c、流動相的黏度要盡量小,以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果;同時降低柱壓降,延長液體泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。

d、流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器,最好使用對紫外吸收較低的溶劑配制。

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